Invitrogen™ Neon™ NxT電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)是新一代電轉(zhuǎn)染平臺(tái)，它采用創(chuàng)新設(shè)計(jì)簡(jiǎn)化了哺乳動(dòng)物的細(xì)胞轉(zhuǎn)染流程。生物相容的移液器吸頭和緩沖液管中的電極可產(chǎn)生比傳統(tǒng)電轉(zhuǎn)染裝置更均勻的電場(chǎng)，從而顯著提高轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞活力。

Neon NxT移液器吸頭用作轉(zhuǎn)染室，無(wú)需將您的樣本轉(zhuǎn)移至單獨(dú)的電轉(zhuǎn)染比色皿中。通過(guò)減少移液的次數(shù)可以節(jié)省時(shí)間，有助于最大限度地減少樣本損失，減少細(xì)胞受到的剪切力，并降低樣本污染的風(fēng)險(xiǎn)。憑借Neon NxT電轉(zhuǎn)染的簡(jiǎn)單工作流程，您甚至可以滿(mǎn)懷信心地轉(zhuǎn)染最具挑戰(zhàn)性的細(xì)胞系。

使用Neon NxT電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，您可以獲得：

• 可靠的性能和極佳的細(xì)胞活力—采用我們專(zhuān)有的電轉(zhuǎn)染吸頭技術(shù)，可幫助您自信地轉(zhuǎn)染具有挑戰(zhàn)性的細(xì)胞系并保持細(xì)胞活力。

• 節(jié)省珍貴樣本—獨(dú)特的Neon NxT移液器吸頭無(wú)需單獨(dú)的電轉(zhuǎn)染比色皿或孔板，同時(shí)該儀器的小巧設(shè)計(jì)使其能夠輕松地安裝在生物安全柜內(nèi)。您寶貴的細(xì)胞不會(huì)因樣本轉(zhuǎn)移而丟失，并降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。

• 節(jié)省時(shí)間—采用相同的緩沖液試劑盒，通過(guò)三個(gè)簡(jiǎn)單的步驟轉(zhuǎn)染細(xì)胞。只需吸取細(xì)胞并將遞送物質(zhì)遞送至Neon NxT移液器吸頭中，將其置于移液器工作站，按下開(kāi)始。現(xiàn)在，轉(zhuǎn)染的細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)容器中。

• 靈活性—針對(duì)不同的細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞密度、遞送物質(zhì)和應(yīng)用，精確優(yōu)化您的電轉(zhuǎn)染參數(shù)。每次可轉(zhuǎn)染1×104 至1x107個(gè)細(xì)胞。

經(jīng)證實(shí)的轉(zhuǎn)染效率

采用我們專(zhuān)有的電轉(zhuǎn)染吸頭技術(shù)，您可以高效轉(zhuǎn)染具有挑戰(zhàn)性的哺乳動(dòng)物細(xì)胞，同時(shí)保持高細(xì)胞活力。我們觀察到了卓越的轉(zhuǎn)染效率（圖1）和細(xì)胞活力（圖2），即使是對(duì)于轉(zhuǎn)染極其困難的細(xì)胞，如免疫細(xì)胞、原代細(xì)胞和干細(xì)胞也是如此。

圖1. Neon NxT電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率。在10 μL或100 μL電轉(zhuǎn)染反應(yīng)中，采用GFP質(zhì)粒DNA或GFP mRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞。轉(zhuǎn)染效率為GFP陽(yáng)性細(xì)胞的百分比（n＝3）。注：初始T細(xì)胞僅在100 μL反應(yīng)中進(jìn)行電轉(zhuǎn)染。

卓越的細(xì)胞活力

我們珍視您的細(xì)胞。Neon NxT電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)能夠在更加可控的條件下進(jìn)行電轉(zhuǎn)染，并省去了兩個(gè)移液步驟。此外，細(xì)胞經(jīng)受的剪切力也更小，因?yàn)樗鼈儾恍枰�被移進(jìn)和移出單獨(dú)的電轉(zhuǎn)染比色皿，有效降低細(xì)胞死亡率，這在處理難以生長(zhǎng)或轉(zhuǎn)染的細(xì)胞時(shí)尤為重要（圖2）。Neon NxT電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)中的電極間隔較寬，且表面積極小。一次性Neon NxT移液器吸頭包含其中一個(gè)電極，而另一個(gè)電極位于NeonNxT緩沖液管的底部。較小的表面積產(chǎn)生更均勻的電場(chǎng)，并且pH值變化極小。電轉(zhuǎn)染過(guò)程中產(chǎn)生的熱量和離子較少，因此細(xì)胞生理?xiàng)l件不會(huì)受到嚴(yán)重干擾。

圖2. Neon NxT系統(tǒng)電轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞活率。在10 μL或100 μL電轉(zhuǎn)染反應(yīng)中，采用GFP質(zhì)粒DNA或GFP mRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞。用Invitrogen™ SYTOX™紅色死細(xì)胞染色劑對(duì)轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行染色，并在Invitrogen™ Attune™ NxT流式細(xì)胞儀上評(píng)估細(xì)胞活率。細(xì)胞活率（%）以3次測(cè)量的平均值報(bào)告。注：初始T細(xì)胞僅在100 μL反應(yīng)中進(jìn)行電轉(zhuǎn)染。

提高基因編輯效率

Invitrogen™ Neon™ NxT 重懸基因編輯緩沖液經(jīng)專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)，通過(guò)在轉(zhuǎn)染后同源定向修復(fù)（HDR）提高基因編輯效率。當(dāng)與Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)和我們的基因編輯試劑一起使用時(shí)，Neon NxT 重懸基因編輯緩沖液可以幫助改善特定遞送物質(zhì)（如CRISPRCas9）的基因編輯性能，特別是在涉及哺乳動(dòng)物細(xì)胞的敲入實(shí)驗(yàn)時(shí)，包括原代細(xì)胞、干細(xì)胞和難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞（圖3）。

圖3. Neon NxT重懸基因編輯緩沖液在基于CRISPR-Cas9的不同細(xì)胞類(lèi)型和靶標(biāo)的基因編輯實(shí)驗(yàn)中的性能。靶位點(diǎn)包括Jurkat和K562細(xì)胞的ACTN、活化原代T細(xì)胞的TRAC、HSC的B2M和原代NK細(xì)胞的AAVS1。在10 _L或100 _L反應(yīng)中電轉(zhuǎn)染細(xì)胞。（A）GFP供體DNA敲入效率報(bào)告為GFP陽(yáng)性細(xì)胞的百分比。（B）GFP供體DNA敲入后細(xì)胞的活率。（C）敲除效率報(bào)告為與未處理對(duì)照相比的特定靶位點(diǎn)減少百分比。對(duì)于原代NK細(xì)胞，通過(guò)基因組剪切檢測(cè)（GCD）測(cè)定indel效率（%）作為敲除效率的替代。（D）敲除細(xì)胞的轉(zhuǎn)染后活率。

節(jié)省研究時(shí)間

簡(jiǎn)化工作流程

在使用儀器時(shí)，我們需要一些對(duì)于初學(xué)者和專(zhuān)家來(lái)說(shuō)都容易使用的操作。 Neon NxT 系統(tǒng)僅需3 個(gè)簡(jiǎn)單的步驟：吸樣、電轉(zhuǎn)染和分液。精簡(jiǎn)的工作流程易于遵循和執(zhí)行，由此培訓(xùn)花費(fèi)的時(shí)間極少，提高了一致性和可重復(fù)性。

縮短處理時(shí)間

與常規(guī)電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)相比，我們專(zhuān)有的電轉(zhuǎn)染技術(shù)不僅簡(jiǎn)化了工作流程，還將整個(gè)過(guò)程縮短至10-15 分鐘[1]。無(wú)需蓋蓋、開(kāi)蓋以及將樣本移進(jìn)和移出單獨(dú)的電轉(zhuǎn)染比色皿——轉(zhuǎn)染發(fā)生在NeonNxT 移液器吸頭中。

1 個(gè)緩沖液試劑盒適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞類(lèi)型

可省去尋找適用于您細(xì)胞系的緩沖液試劑盒的麻煩。通過(guò)采用一個(gè)與150 多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞系兼容的緩沖液試劑盒，我們簡(jiǎn)化了這一過(guò)程。此外，我們還建議在低于1,900 V 的電壓下使用Invitrogen™ Neon™ NxT 重懸R 緩沖液，在更高的電壓下使用Invitrogen™ Neon™ NxT 重懸T 緩沖液。該套裝還包括Neon NxT 重懸基因編輯緩沖液，可實(shí)現(xiàn)出色的基因編輯效率。使用我們優(yōu)化的方案轉(zhuǎn)染常用細(xì)胞系，或按照我們新細(xì)胞系的標(biāo)準(zhǔn)流程優(yōu)化轉(zhuǎn)染方案。

省時(shí)的孔板設(shè)置

孔板設(shè)置模式將效率提升至另一個(gè)水平。Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的直觀用戶(hù)界面為您的電轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)設(shè)置提供了一種有效的方法。您可以預(yù)先設(shè)置整個(gè)孔板，并在對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行電轉(zhuǎn)染時(shí)在屏幕上監(jiān)控進(jìn)度，而非使用Quick Start 調(diào)整樣本之間的電轉(zhuǎn)染參數(shù)。

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