抗體毀了你的western blot實驗？親，你并不是孤單的一個人。有時，你會發(fā)現(xiàn)新一批次的抗體無法再現(xiàn)之前的結(jié)果。有時，你甚至發(fā)現(xiàn)抗體根本不能與目標蛋白結(jié)合。錢花了不說，時間也一去不復返。如何選擇適當?shù)腤B抗體，讓Bio-Rad的專家來教你幾招。

1. 根據(jù)應用來購買

抗體是一個通用的工具，但它們本身也有局限性。有些抗體無法結(jié)合變性的蛋白，這就讓它在western blot中表現(xiàn)很糟。你要購買的產(chǎn)品最好是經(jīng)過western blotting的驗證，有數(shù)據(jù)做支持。如果只有幾篇文獻，那要小心，因為它通常只顯示了目的條帶，而不清楚是否有非特異的條帶。

2. 查看所有的數(shù)據(jù)

供應商的網(wǎng)站通常列出了抗體的應用以及引用的文獻，你應該一篇一篇地去看。如果在選購時參考的數(shù)據(jù)不多，那么實驗可能會有風險。

3. 并非所有驗證都相同

一些供應商會明明白白地告訴你它們?nèi)绾悟炞C抗體。為了節(jié)約時間和成本，許多公司并沒有驗證每一批的抗體，因此批次之間可能存在相當大的差異。有些公司在驗證中使用過表達的蛋白來證明抗體能夠與目的蛋白結(jié)合。由此產(chǎn)生的數(shù)據(jù)并不能很好地說明抗體在western blot中表現(xiàn)如何。抗體若是經(jīng)過全細胞裂解液以及各種樣品的檢驗，每一批都是如此，那么就值得購買。

4. 使用第三方資源

一些機構(gòu)，如CiteAb，提供了抗體引用的數(shù)據(jù)庫。而另一些自己開展檢測，并公開他們的數(shù)據(jù)。不過，盡管他們綜合了大量的數(shù)據(jù)，但這往往來自單一來源，通常是二手的。因此，你需要檢查這些信息是否與供應商網(wǎng)站上的一手數(shù)據(jù)一致。

5. 看看有沒有試用裝

許多公司現(xiàn)在提供小包裝的抗體，讓你大膽嘗試，再決定是否購買大包裝。這可是個好機會，既能驗證抗體是否適合你的實驗，又不用擔心浪費太多錢。

6. 做好優(yōu)化的準備

供應商的驗證并不能完全取代內(nèi)部的檢驗。你的樣品不同，操作步驟也不完全相同。而這些因素都會影響抗體的表現(xiàn)，因此需要將你的western blot與抗體的驗證分開而論。你的研究，最終還是需要你來把關(guān)。

7. 最終原則

無論你是采購還是使用抗體，你都必須記住抗體技術(shù)存在缺陷，它們可能會有變化。在選擇抗體時需要嚴謹。盡可能使用陽性和陰性對照，控制你自己的偏見，確保你的western blot能提供正確的答案。（生物通 薄荷）

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