Western blot想一次成功，那幾乎是mission impossible。這么多的環(huán)節(jié)，這么多的試劑，往往需要反復(fù)優(yōu)化，才能獲得理想的結(jié)果。然而，一家公司提出了一個很牛的口號，那就是“絕不多跑一次（Never Run a Gel Again）”。這家公司就是ProteinSimple。

ProteinSimple不像其他公司那樣，對傳統(tǒng)的Western blot進行改進，而是徹底改造，利用毛細管電泳將整個過程自動化，創(chuàng)建出Simple Western分析。2011年，這家公司推出了Simon，第一臺自動化開展Western blot的儀器。它改變了我們對于Western blot的想象，堪稱蛋白實驗室的“dream machine”。這臺儀器上市后，市場反應(yīng)熱烈。

2014年初，ProteinSimple又推出了三款儀器，分別是Wes、Sally Sue和Peggy Sue。Wes（韋斯）作為經(jīng)濟的Simple Western儀器，能夠在3小時內(nèi)分析多達25個樣品。Sally Sue（薩莉•蘇）和Peggy Sue（佩姬•蘇）則是高通量的儀器，每次能夠分析96個樣品。此外，Peggy Sue還能按照電荷分離蛋白，大大節(jié)省樣品的用量。

這些儀器將所有步驟自動化，包括蛋白分離、免疫雜交、洗滌、檢測以及數(shù)據(jù)分析。你只需將樣品、一抗、二抗和檢測試劑加入微孔板，按下Start就行了。之后的幾小時便由你自由支配。回來時，等著你的就是完全分析好的數(shù)據(jù)了。

Simple Western可以兩種方式開展 – 根據(jù)大小或電荷分離蛋白質(zhì)。

基于大小的分析可在Wes、Peggy Sue或Sally Sue上開展。當?shù)鞍籽刂�毛細管�?nèi)一個堆積和分離基質(zhì)遷移時，它們分離。分離后的蛋白固定到毛細管壁上。之后利用一抗鑒定目標蛋白，用HRP結(jié)合的二抗和化學(xué)發(fā)光底物檢測蛋白。系統(tǒng)會自動報告檢測蛋白的分子量和信號。

整個過程不需要手動操作，這大大減少了實驗的可變性，提高了數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可靠性。據(jù)統(tǒng)計，Western blot的實驗差異性高達35-45%，而有了這些儀器，差異性能夠控制在15%以下。對于25個樣品的分析，Wes在3小時內(nèi)即可完成。即使是96個樣品，19個小時也能搞定。它們能分離和檢測高達440 kDa的蛋白，這對研究大蛋白的童鞋來說真是福音。

基于電荷的分析可以在Peggy Sue或NanoPro 1000上開展。基本流程同上，不過是根據(jù)蛋白的等電點來分離。這種分析最少只需25個細胞，非常適合珍貴的樣品，比如激光捕獲顯微切割的病理細胞，流式分選的血液病細胞，細針穿刺樣品等。96個樣品可一次處理，在11小時后獲得結(jié)果。

斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Alice Fan表示，她對Simple Western技術(shù)最滿意的地方就是它能夠分析納升級的樣品。Fan將患者的組織樣品保存了十多年，就是在等待一種工具來分析腫瘤細胞的蛋白質(zhì)組學(xué)，而不需要用光整個樣品。“這么多年來，我一直在尋找一種東西，讓我能夠以極少量組織開展Western blot，”她解釋道。

除了幫助她節(jié)省寶貴的組織，這種儀器還讓她能夠利用細針穿刺，在不同時間從一名患者中抽取樣品。Fan認為，這有望實時了解患者的腫瘤如何響應(yīng)藥物。“這是一個巨大的飛躍。”

至于哪臺儀器最適合你？下表應(yīng)該能幫你做出選擇。如果需要詳細資料或詢價，請點擊此處。

（生物通 余亮）