Western blot的原理雖簡單，但步驟多，過程長，往往需要反復優化，才能獲得滿意的結果。過去，每個新人的Western blot經歷，都是一段心酸的血淚史。在清晨踏著露珠出發，在夜晚頂著星星回家，只是為了在當天看到Western blot的結果。然而，漂亮結果有時卻是千呼萬喚也不出來。這個時候，老板的臉色可真是不忍細看。

最近幾年，在Western blot領域，有不少新產品上市，它們能加快實驗進程，將我們從繁重的體力勞動中解放出來，還能改善實驗結果。下面，就讓生物通帶你來看看這些“高端大氣上檔次”的產品，特別是后面兩種“神器”，關鍵時候也許能幫你一把。

35分鐘電泳

配膠，是Western blot萬里長征中的第一步。雖說現在的膠槽不斷改進，配膠越來越方便，漏膠等“意外事故”也相對比較少發生了，但手工配制的凝膠過程仍然是一件不太穩定不太均勻的事情，即使制膠過程每個步驟看起來都完美，跑膠后一看常常出現各種莫名其妙的條帶扭曲變形模糊拖尾等情況，還真讓人抓狂。有時間你盡管慢慢耗，對于稀有樣品或者時間緊迫條件下，即開即用的預制膠當然是最好的選擇。

Life Technologies的Blot™ Bis-Tris Plus凝膠就是專為Western blot而設計，可讓您獲得更清晰的條帶。與傳統的Tris-甘氨酸凝膠不同，Bolt™ Bis-Tris Plus凝膠采用Bis-Tris-HCl緩沖液（pH 6.4），工作pH約為7.0。這種中性pH配合獨特而溫和的樣品制備實驗方案可使您的蛋白質樣品始終處于溫和的非酸性條件，從而保護蛋白質的完整性并最大程度減少對蛋白質的修飾，確保每次均獲得高度靈敏且準確的蛋白質印跡。

與經典的NuPAGE預制膠一樣，Blot™ 預制膠具有極佳的條帶分辨率、條帶質量，而批次間一致性就更不必說了，將手工制膠甩出幾條大街。有了Blot™ 預制膠，您將不再看到“笑臉”、斑點或拖尾，取而代之的將是sharp的條帶。。

有時，為了檢測低豐度蛋白，您需要上樣較多的樣品，當然，這不能強求，因為上樣量過大，樣品會溢到相鄰孔中，造成污染。而對于Blot™凝膠，您就完全不必擔心了。它采用全新的專利楔形孔，使得每孔的蛋白上樣量增加了一倍。10孔的Blot™凝膠最多可上樣55 μL。

與Blot™凝膠配套使用的是Blot™ Mini電泳槽。這種電泳槽采用兩個并排的電泳槽結構，可同時觀察兩塊凝膠，也更節約電泳緩沖液。同時，它采用新型的白色電泳槽底板，更方便觀察預染marker。利用Blot™ Mini電泳槽和Blot™凝膠，蛋白電泳可在35分鐘內完成。而以前的配膠加電泳，至少需要兩個小時吧。另外，NuPAGE預制膠也是可以在Bolt槽上運行的哦！

這么高大上的預制膠，看著雖然很美，但價格就不太美了。不過，如果趕上神馬促銷優惠，還是挺劃算的。Life Tech有個迎新套裝，購買后即可免費獲贈Blot™ Mini電泳槽。

7分鐘轉印

以往，轉印需要數小時完成，而如今一些新儀器讓轉印時間大大縮短。Life Tech之前推出的iBlot® 干式轉印系統因7分鐘的轉印而大受歡迎，目前已有2000多篇文獻引用。正如一位研究人員所說：“之前，我們轉膜通常要花2小時以上，如今，7分鐘就完成了。我再也不用擔心不能按時回家了。”的確，一臺方便的儀器，不僅能快速帶來結果，也讓我們能享受到更多的家庭歡樂。

Western不再有壓力，半天輕松完成

如今，iBlot干式轉印系統已升級到第2代。iBlot 2在原有快速轉印系統的基礎上，具有更加美觀和牢固的工業設計。它采用時下流行的觸摸屏設計，讓操作更加簡潔友好。儀器預設6種操作程序，當然，您也可以根據目標蛋白來自定義新程序，滿足不斷變化的實驗需求。

在轉印時，我們需要使用iBlot 2凝膠轉印膜組。這個膜組分頂部和底部兩個部分。頂部含銅質陰極和iBlot陰極轉印膜組，而底部除了銅質陽極和iBlot陽極轉印膜組外，還包含一張0.2 μm孔徑的NC膜或PVDF膜。這些膜組中已包含陰極和陽極緩沖液，無需配制緩沖液。電泳完成后，取出凝膠，組裝轉印膜組，趕走氣泡，即可開始轉印。只需7分鐘就能完成蛋白的高效轉移。與濕式或半干式轉印相比，時間更短，且檢測靈敏度更高。

iBlot 2轉印裝置適用于多種不同化學成分的預制膠或自制膠，并有兩種尺寸的轉印膜組可供選擇。您若是轉印一塊中型凝膠（8x13 cm）或兩塊微型凝膠（8x8 cm），可以選擇普通型轉印膜組。若是只有一塊微型凝膠，可以選擇迷你型轉印膜組。

怎么樣？心動了吧。還在為價格而猶豫？告訴您個好消息。即日起至2014年6月30日，購買1臺iBlot 2凝膠轉移儀，即可免費獲贈4盒轉印膜組（2盒普通型+2盒迷你型），PVDF或NC任選。抓住機會哦!

自動化封閉+孵育

到這里，Western blot最痛苦的階段似乎已經過去，剩下便是按部就班的封閉、一抗和二抗孵育了。但每隔一兩個小時的換液，重復3次、每次3分鐘的洗滌也讓您脫不開身。若是有一臺儀器，能夠像面包機一樣，加入各種試劑，所有孵育和洗滌均能自動化完成，那可就太方便了。Life Tech果然推出了一款Western blot中的面包機——iBind™全自動蛋白印跡處理系統。

這臺儀器無需手工操作，即可重復、快速地自動完成Western blot中的封閉、一抗和二抗孵育及所有洗滌步驟，將您從繁雜的實驗操作中解放出來。同時，避免人為因素影響，提高實驗的可重復性。

iBind小巧輕便，大小僅為24.2 cm x 14.6 cm x 3.5 cm（長x寬x高），比iPad Mini略大一點。更為神奇的是，它不需要外部電源，在實驗室的任何地方都能使用。究竟是如何實現的呢？這要歸功于一種名為順序側流（Sequential Lateral Flow，簡稱SLF）的新技術。

在操作過程中，我們需要一種iBind™卡片。將iBind™卡片置于儀器中，并加入緩沖液后，將印跡膜放在卡片上，趕走氣泡。之后，依次加入抗體和溶液。SLF技術通過在iBind卡片上施加機械壓力，讓一抗和二抗及時釋放。iBind卡片內嵌入的玻璃纖維使得抗體和洗滌液以恒定的速度流過印跡膜。而卡片一端的吸附膜組可以使液體流過卡片及膜。這樣，您加入試劑后即可離開，系統自動完成封閉、一抗和二抗孵育及所有洗滌步驟。

對于多種抗體而言，相對于手動方法，iBind系統帶來了更高的靈敏度，更低的背景，以及更佳的印跡間一致性。此外，實驗流程也大大縮短，從原來的十幾個小時縮短到2.5小時，而設置時間也僅需15分鐘。這些步驟完成后，印跡膜即可取出，利用Novex®化學發光檢測試劑盒來進行檢測。這一即用型試劑盒專為iBind而設計，可實現fg級的超靈敏檢測，且信號持續5天。

目前，Life Technologies提供iBind™起始套裝，內含一臺iBind蛋白印跡處理儀、一盒iBind 卡片（10張）和一個iBind溶液試劑盒，讓您能立即開始操作。這個卡片和溶液都是耗材，之后還需購買。每張卡片可運行一張迷你的膜。

如今，有了這一整套工具，Western blot不再是噩夢了吧。只需一上午的時間，我們就能從蛋白電泳、轉膜到印跡檢測，獲得準確又可靠的結果。有了好的結果，還愁沒有好的paper嗎？（生物通 余亮）

Western不再有壓力，半天輕松完成