新一代流式分選儀

21世紀以來，以MoFlo和FACSAria系列為代表的電荷式分選儀以其高速和多參數(shù)分選的特性，已經(jīng)成為細胞分選領(lǐng)域不可獲取的技術(shù)方法。但是，傳統(tǒng)的電荷式流式分選儀也面臨著一些問題。首先，機器以較高的壓力驅(qū)動液流高速的流動，鞘液會包裹著細胞斷裂成液滴，機器對帶目標細胞的液滴充以不同的電荷，帶電液滴在電場中發(fā)生偏轉(zhuǎn)從而實現(xiàn)高純度的分選，但是高壓、高速、高電荷經(jīng)常會引起細胞活性差、得率低的問題；其次，傳統(tǒng)分選鞘液和細胞要在外界打開，很難保證無菌，而且不同樣本間還會發(fā)生交叉污染的問題；另外，電荷式分選會產(chǎn)生氣溶膠污染，對于感染性的樣本會產(chǎn)生生物安全性問題。新一代流式分選儀MACSQuant® Tyto采用多種創(chuàng)新的系統(tǒng)，能很好的解決這些問題，將流式分選帶入了一個新時代。

MACSQuant® Tyto分選原理

 
圖1：細胞在較小的壓力下通過激光的檢測區(qū)域，檢測到目標細胞后微芯片控制的閥門會打開，目標細胞流入樣本收集孔中；非目標細胞經(jīng)過時，閥門處于閉合狀態(tài)，細胞進入廢液孔中。分選過程中，沒有高壓和電荷的刺激，最大程度的保證細胞的活性；而且沒有產(chǎn)生液滴和氣溶膠，對分選操作人員沒有生物安全性危害。

世界上最快的閥

傳統(tǒng)的機械式分選速度很慢，近年來由于微芯片技術(shù)的發(fā)展，微芯片控制的機械閥開合一次僅需幾十微秒，已經(jīng)達到傳統(tǒng)分選儀每秒鐘分選上萬個細胞的速度。

 
圖2：MACSQuant® Tyto采用全封閉的無鞘液設(shè)計，全部液流系統(tǒng)位于一個樣本盒中，樣本盒中最關(guān)鍵的部件是一個微芯片控制的閥門，通過閥門的開合控制細胞的分選。該樣本盒采用卡槽式的設(shè)計，不同的細胞樣本可以更換樣本盒，避免樣本間交叉污染的風險，而且全封閉的設(shè)計保證細胞處于無菌狀態(tài)。

分選實例

 
圖3：從稀釋的全血或PBMC中分選目標細胞。A：分選前稀釋的全血中CD4+細胞的比例；B：分選后CD4+細胞的比例；C：少量MART-1抗原特性的T細胞和PBMC混合，分選前該克隆細胞的比例；D：分選后MART-1抗原特異性T細胞比例檢測。