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自己動(dòng)手 制備預(yù)制膠品質(zhì)的凝膠[新品推薦]
【字體: 大 中 小 】 時(shí)間:2013年11月06日 來源:生物通
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Bio-Rad此次推出了兩個(gè)版本的TGX FastCast丙烯酰胺試劑盒,一個(gè)是普通版,另一個(gè)是免染版本。這兩個(gè)試劑盒讓用戶能夠在灌制聚丙烯酰胺凝膠后,享受到快速運(yùn)行、高效蛋白轉(zhuǎn)移以及可重復(fù)的結(jié)果。而免染技術(shù)能讓您在蛋白電泳和免疫印跡的全程進(jìn)行監(jiān)控。
幾年前,Bio-Rad曾推出Stain-Free免染技術(shù),大大簡(jiǎn)化了蛋白電泳的凝膠分析。許多用戶都對(duì)此頗感興趣,但礙于它必須使用TGX Stain-Free預(yù)制膠,成本太高。如今,Bio-Rad帶來了一個(gè)好消息,TGX Stain-Free預(yù)制膠也能自己制備了。
Bio-Rad此次推出了兩個(gè)版本的TGX FastCast丙烯酰胺試劑盒,一個(gè)是普通版,另一個(gè)是免染版本。這兩個(gè)試劑盒讓用戶能夠在灌制聚丙烯酰胺凝膠后,享受到快速運(yùn)行、高效蛋白轉(zhuǎn)移以及可重復(fù)的結(jié)果。而免染技術(shù)能讓您在蛋白電泳和免疫印跡的全程進(jìn)行監(jiān)控。
過去,制膠是個(gè)頗為耗時(shí)的過程,大約要苦等上1個(gè)小時(shí),才能開始電泳。FastCast凝膠顧名思義,制備起來更快,只需30分鐘,從而節(jié)省了寶貴的制備時(shí)間。在這些凝膠上開展的蛋白電泳也只需20分鐘,比傳統(tǒng)的Tris-HCl凝膠快了不少。
這種手工制備的凝膠與Bio-Rad的TGX預(yù)制膠一樣,利用全能型蛋白轉(zhuǎn)印系統(tǒng)(Trans-Blot® Turbo™),只需3分鐘,即可完成蛋白轉(zhuǎn)印。此外,F(xiàn)astCast凝膠在制備好后最多可保存4周,這樣您就可以在空閑的時(shí)候一次制備多塊凝膠,即用即取,十分方便。
弗吉尼亞理工理工學(xué)院的研究生Aaron Ramsey談道:“4周的保質(zhì)期對(duì)我非常有用,因?yàn)槲抑笆止す嘀频哪z只能放兩到三天,迫使我在這個(gè)有限的時(shí)間內(nèi)計(jì)劃實(shí)驗(yàn)。如今我可以一次灌制好多塊凝膠,持續(xù)用幾個(gè)星期。”
TGX Stain-Free FastCast丙烯酰胺試劑盒能夠手工制備免染的FastCast凝膠,在Bio-Rad的免染成像系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)3-5分鐘的蛋白檢測(cè)。這讓研究人員能夠在短短1小時(shí)內(nèi),完成制膠、蛋白分離、凝膠成像和數(shù)據(jù)分析。
免染技術(shù)的重要性在免疫印跡實(shí)驗(yàn)中得到了更好的體現(xiàn)。你可以在全過程監(jiān)控實(shí)驗(yàn),在使用抗體前進(jìn)行蛋白樣品的品質(zhì)監(jiān)控,而且也能輕松地優(yōu)化轉(zhuǎn)印條件。免染技術(shù)還讓您用總蛋白來作為Western Blot實(shí)驗(yàn)時(shí)的Loading control,這比看家蛋白要準(zhǔn)確得多。
多倫多大學(xué)分子遺傳學(xué)系的Alan Cochrane教授認(rèn)為:“TGX Stain-Free FastCast丙烯酰胺試劑盒讓我不再使用其他抗體來檢測(cè)loading control,因?yàn)槲夷苁褂妹馊境上裣到y(tǒng)來進(jìn)行樣品中多個(gè)蛋白的標(biāo)準(zhǔn)化。”
過去只能利用預(yù)制膠完成的實(shí)驗(yàn),如今也可以通過手動(dòng)制膠來實(shí)現(xiàn)了。這對(duì)于天天跑電泳的人來說,確實(shí)是個(gè)好消息。(生物通 余亮)
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